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玉米茎腐病鉴定技术
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1 范围
本标准规定了山东省玉米茎腐病鉴定方法。
本标准适用于山东省玉米茎腐病田间和实验室鉴定。
2 术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
2.1 玉米茎腐病 Corn stalk rot
玉米茎腐病是由多种病原菌单独或复合侵染引起的根系、茎基部和茎秆一类土传病害总称,主要包括青枯型和黄枯型两种。病原菌为瓜果腐霉[Pythium aphanidermatum (Eds) Fitzp]和禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum Schwabe)。
3 茎腐病田间症状鉴定
玉米进入灌浆至乳熟期时,全株叶片突然快速失绿褪色,无光泽,似水烫,2 d~3 d叶片呈现为青灰色干枯并下垂,植株直立不倒伏,但在2~3周后出现倒伏。植株近地表的1~3茎节表皮失绿,逐渐变为褐色并失去硬度,内部茎髓组织分解变空,严重时发病茎节产生缢缩,茎秆易发生倒折;根系呈黑褐色,逐渐腐烂,植株易被拔起;雌穗穗柄部变软,雌穗倒挂,植株早衰。
3.1青枯型症状
青枯型也称急性型,发病后叶片自下而上迅速枯死,呈灰绿色,水烫状或霜打状,该类型主要由瓜果腐霉菌为主侵染引起。
3.2黄枯型症状
黄枯型也称慢性型,发病后叶片自下而上逐渐黄枯,该症状类型主要由禾谷镰刀菌为主侵染引起。
4 茎腐病病原形态鉴定
4.1 PDA培养基
马铃薯去皮切片,称取200 g,加1000 mL蒸馏水,煮沸20 min,用纱布过滤,加补蒸馏水至1000 mL,加20 g琼脂粉,加热溶化后,再加入葡萄糖20 g,搅拌均匀并溶化后,于121 ℃高压灭菌30 min。
4.2 病原分离
在无菌条件下,将病样茎基部2~3节直接剖茎,挖取2~3节部位髓组织0.3 cm~0.5 cm见方的小块,每个培养皿放4块,在PDA培养基上,培养2 d~7 d后得到初分离物,并及时纯化。
4.3 分离物鉴定
参见附录A和B。
5 病原分离物致病性鉴定
5.1 原理
根据科赫(Koch)法则,将病原分离物在与病样同品种玉米灌浆初期进行回接,验证其是否为玉米茎腐病致病菌。
5.2 接种方法
将玉米粒浸泡12 h,煮沸1 h,121 ℃高温高压灭菌2 h,制作成玉米粒培养基。将病原分离物分别在玉米粒培养基上扩繁得到玉米粒菌剂,在玉米灌浆初期进行土壤接种。
5.3 结果调查与分析
玉米乳熟后期进行调查,出现4.1.1所表述的青枯型症状及4.1.2表述的黄枯型症状均可判定,分离物中含有玉米茎腐病致病菌。
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